[생물학 실험] 전기영동 실험

May 02, 2014

[생물학 실험] 전기영동 실험

해당 자료는 해피레포트에서 유료결제 후 열람이 가능합니다.

분량 : 5 페이지 /hwp 파일

설명 : 입자가 아닌 액체가 고정된 막(膜)을 통과하는 것을 전기삼투(electroosmosis)라고 한다. 스웨덴의 화학자인 아르네 티셀리우스가 1930년경에 전기영동을 분석기술로 이용하는 방 법을 처음 소개했으며, 그가 고안한 이동경계법은 콜로이드 입자를 포함하고 있는 특정 액체 위에 콜로이드 입자를 포함하지 않는 순수한 액체를 첨가했을 경우에 나타나는 2가 지 액체의 경계가 콜로이드 입자의 전기영동속도로 이동한다는 사실을 밝혔다.

1번 lane부터 6번 lane까지 모두 5개의 sample을 각각 10㎕ 씩 loading한 것이다.
전기영동 결과 단백질은 각각의 분자량에 의해 분리된다. 위쪽에 위치하는 band일수록 분자량이 크며, 밑쪽이 분자량이 작다. 제일 왼쪽 레인에는 단백질의 분자량을 알고 있는 시료를 넣어 분자량의 marker로 사용할 수 있다. band가 굵게 나타나는 것들이 있는데, 이는 그에 해당하는 protein의 양이 많은 것이다.

4. Discussion
- size maker 란 것으로 단백질의 크기를 대략 알 수 있었다. 하지만 크기를 안다고 해서 그것이 무슨 단백질인지 알 수는 없다. 특히 크기가 같다고 해도 20개의 아미노산의 수많은 조합으로 형성된 그것이 같은 단백질인지 아닌지 구별하기가 어려웠다.

- No cut에서 single band가 나오지 않는 이유평소 E.coli의 플라스미드의 DNA는 그림과 같이 supercoiled form으로 존재하지만, 한 쪽 strand에 nick이 생기면 supercoil이 풀어져서 open circular form이 된다. 즉, 원래는 대부분 supercoiled form DNA만 보이지만 분리과정에서 작은 충격을 입어서 open circular form이 조금 나타날 수 있는 것이다. (supercoiled form DNA - 아래 위치 한 진한 band / open circular form - 위쪽에 위치한 옅은 band) 실제로 같은 DNA가 supercoiled, linear, open circular form으로 존재할 수 있는데, 이 들을 전기영동하면 같은 염기서열의 같은 크기 DNA라도 이동하는 거리가 제각기 다르다. 따라서 no cut의 경우임에도 불구하고 single band를 볼 수 없게 되는 것이다.